UV紫外光度計特征性強

　　UV紫外光度計的設(shè)計道理和事情道理,允許吸光值在一定范圍內(nèi)變化,即儀器有一定的準確度和度。如Eppendorf Biophotometer的準確度≤1.0%(1A)。這樣多次測試的結(jié)果在均值1.0%左右之間變動,都是沒事了的。另外,還需考慮核酸本身物化性質(zhì)和溶解核酸的緩沖液的pH值,離子濃度等:在測試時,離子濃度過高,也會導(dǎo)致讀數(shù)漂移,因此建議使用pH值一定、離子濃度較低的緩沖液,如TE,可大大不變讀數(shù)。樣品的稀釋濃度同樣是不成忽視的因素:因為樣品中不成避免存在一些細小的顆粒,尤其是核酸樣品。這些個小顆粒的存在干擾測試效果。UV紫外光度計為了zui大水平減少顆粒對測試結(jié)果的影響,要求核酸吸光值至少大于0.1A,吸光值在0.1-1.。在此范圍內(nèi),顆粒的干擾相對較小,結(jié)果不變。從而意味著樣品的濃度不能過低,或過高(超過光度計的測試范圍)。zui后是操作因素,如混合要充分,否則吸光值過低,甚至出現(xiàn)負值;混合液不能存在氣泡,空白液無懸浮物,否則讀數(shù)漂移劇烈;必需使用相同的比色杯測試空白液和樣品,否則濃度差異太大;換算系數(shù)和樣品濃度單元選擇一致;不能采用窗口磨損的比色杯;樣品的體積必需到達比色杯要求的zui小體積等多個操作事項。

　　UV紫外光度計這個基團就吸收一定頻率的紅外線，把分子吸收的紅外線的情況用儀器記錄下來，便能得到全面反映試樣成份特征的光譜，從而推測化合物的類型和結(jié)構(gòu)。IR光譜主要是定性技術(shù)，但是隨著比例記錄電子裝置的出現(xiàn)，也能迅速而準確地進行定量分析。

　　安裝好UV紫外光度計后，檢查樣池位置，使其處在光路中（拉動拉手應(yīng)感應(yīng)到每檔的定位），關(guān)好樣品室門，打開儀器電源開關(guān)，預(yù)熱10分鐘，即可進行測量。打開樣品室門，將方式定于透過率檔，按0%T進行機械調(diào)零。從蒸餾水中取出比色皿，擦干。注意拿比色皿的時候拿毛玻璃面。向比色皿內(nèi)注入少量試液，潤洗三次，然后注入3/4至4/5的試液，用濾紙片擦干外壁所掛水珠。 將比色皿按順序放入樣品池。注意光面對光源。

　　UV紫外光度計是較為常用的一種數(shù)字顯示光度計。 它以碘鎢燈為光源，光柵為色散元件。可用波長范圍是330~800nm，波長精度2nm，波長重現(xiàn)性為0.5nm，單色光帶寬6nm，吸光度顯示范圍為0~1.999，UV紫外光度計吸光度的精度為0.004(A=0.5)，試樣架可置四個吸收池。