國產分光光度計已經成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。采用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源,光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
國產分光光度計的光度重復性(Photometric repeatability)又稱光度精密度(Photometric precision),是很重要的技術指標。它被定義為:多次測量(一般為3-5次,有時要求7次)中,大值與小值之差。光度重復性還表征紫外可見分光光度計闡發(fā)測試結果的可靠性。一般來講,我們希望一臺儀器在同樣的條件下,對同一個樣品,不管什么人操作,其結果都在要求的誤差范疇內。
光度重復性的測試方法很簡單。一般選定一個標準樣品(也可用使用者自己任選的樣品),由同一個操作者,進止3-5次測試,再計算光度重復性。具體操作方法為:儀器冷態(tài)開機(即關機2h后開機),預熱半小時后,對標準樣品或使用者自選的樣品進止光譜掃描,然后在譜圖上選擇幾個特征吸收峰,檢查在選定的測量次數內,各個峰值的大值與小值之差即為光度重復性。人們常常將光度準確度和光度重復性在一次操作中完成。
國家計量檢定規(guī)程和分光光度計檢定規(guī)程都規(guī)定,光度重復性要測試三次,取三次中的大小值之差作為光度重復性。